中国·金沙(9170·ESPN认证)官方入口登录-The lead

                                        中华人民共和国国家标准

　　　　　　　　　　　食品中山梨酸、苯甲酸的测定方法　　　　GB 5009.29-85

Method for determination of sorbic acid and benzoic acid in foods
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
本标准适用于油、水果汁、果酱中山梨酸、苯甲酸含量的测定。

　　　　　　　　　　　　　　第一法　薄层色谱法
1　原理
　　样品酸化后,用乙醚提取山梨酸、苯甲酸。将样品提取液浓缩,点于聚酰胺薄层板上,
展开。显色后,根据薄层板上山梨酸、苯甲酸的比移值,与标准比较定,并可进行概略
定量。
2　试剂
2.1　异丙醇。
2.2　正丁醇。　　
2.3　石油醚：沸程：30～60℃。
2.4　乙醚: 不含过氧化物。
2.5　氨水。
2.6 6N盐酸: 取100mL盐酸,加水稀释至200mL。
2.7　无水乙醇。
2.8　聚酰胺粉：200目。
2.9　山梨酸准溶液：精密称取0.2000g山梨酸,用少量乙醇溶解后移入100ml容量瓶中
并稀释至刻度,此溶液每毫升相当于2mg山梨酸。
2.10　苯甲酸标准溶液:精密称取0.2000g苯甲酸,用少量乙醇溶解后移入100ml容量瓶中,
并稀释至刻度,此溶液每毫升相当于2mg苯甲酸。
2.11　展开剂
2.11.1 正丁醇-氨水-无水乙醇(7：1：2)。
2.11.2 异丙醇-氨水-无水乙醇(7：1：2)。
2.12 显色剂：0.04％溴甲酚紫的50％乙醇溶液,用0.1N氢氧化钠溶液调至pH=8。
2.13 4％氯化钠酸性溶液：于4％氯化钠溶液中加少量6N盐酸酸化。
3 仪器
3.1 吹风机。
3.2 层R缸。
3.3　玻璃板：10×18cm。
3.4　微量注射器：10μL,100μL。
3.5　喷雾器。
4　操作方法
4.1　样品提取:
　　称取2.5g事先混合均匀的样品,置于25ml带塞量筒中,加0.5ml 6N盐酸酸化,用15、
10ml乙醚提取两次,每次振摇1min,将上层醚提取液吸入另一个25ml带塞量筒中,合并乙
醚提取液。用3ml4％氯化钠酸性溶液洗涤两次,静止15min,用滴管将乙醚层通过无水硫
酸钠滤入25ml容量瓶中。加乙醚至刻度,混匀。吸取10.0ml乙醚提取液分两次置于10ml带
塞离心管中,在约40℃的水浴上挥干,　加入0.10ml乙醇溶解残渣,备用。
4.2　测定
4.2.1　聚酰胺粉板的制备：称取1.6g聚酰胺粉,加0.4g可溶性淀粉,加约15ml水,研磨
3～5min,立即倒入涂布器内制成10×18cm、厚度0.3mm的薄层板两块,于室温干燥后,于
80℃干燥1h,取出,置于干燥器中保存。
4.2.2　点样：在薄层板下端2cm的基线上,用微量注射器点1μL、2μl样品液,同时各点
1μl、2μl山梨酸、苯甲酸标准溶液。
4.2.3　展开与显色：将点样后的薄层板放入预先盛有展开剂(2.11.1或2.11.2)的展开槽
内,展开槽周围贴有滤纸,待溶剂前沿上展至10cm,取出挥干,喷显色剂,斑点成黄色,
背景为蓝色。样品中所含山梨酸、苯甲酸的量与标准斑点比较定量(山梨酸、苯甲酸的比
移值依次为0.82,0.73)。
4.2.4　计算：
A1 × 1000
X1 = ─────────────..........(1)
m1 × 10/25 ×V2/V1×1000
式中：X1―─样品中山梨酸(苯甲酸)的含量,g/kg;
　　　A1―─测定用样品液中山梨酸(苯甲酸)的含量,mg;
　　　m1――样品质量,g;
　　　V1――加入乙醇的体积,mL;
　　　V2──测定时点样的体积,mL;
　　　10――测定时吸取乙醚提取液的体积,mL;
　　　25――样品乙醚提取液总体积,mL。
　　　注：本方法还可以同时测定果酱、果汁旱奶蔷。

　　　　　　　　　　　　　　第二法　气相色谱法

5　原理　　　　
　　样品酸化后,山梨酸、苯甲酸用乙醚提取浓缩后,用附氢火焰离子化检测器的气相色
谱仪进行分离测定,与标准系列比较定量。
6　试剂
6.1　乙醚。
6.2　石油醚：沸程30～60℃。
6.3　盐酸。
6.4　无水硫酸钠。
6.5　山梨酸、苯甲酸标准溶液: 精密称取山梨酸、苯甲酸各0.2000g,置于100ml容量瓶
中,用石油醚-乙醚(3：1)混合溶剂溶解后并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于2mg山梨
酸或苯甲酸。
6.6　山梨酸、苯甲酸标准使用液：0取适量的山梨酸、苯甲酸标准溶液,以石油醚-乙醚
(3：1)混合溶剂稀释至每毫升相当于50、100、150、200、25Oμg山梨酸或苯甲酸。
7　仪器
　　气相色谱仪：具氢火焰离子化检测器。
8　操作方法
8.1　样品提取
　　按4.1自“称取2.5g”至“加乙醚至刻度”依法操作。准确吸取5mL乙醚提取液于5mL
带塞刻度试管中,置40℃水浴上挥干,加入2ml石油醚-乙醚(3：1)混合溶剂溶解残渣,备
用。
8.2　色谱条件
8.2.1　色谱柱：玻璃柱,内径3mm,长2m,内装涂以5%DEGS+1%H3PO4固定液的60～80目
Chromosorb W AW。
8.2.2　气流速度: 载气,氮气,50ml/min(氮气和空气、氢气之比按各仪器型号不同选择
各自的最佳比例条件。)
8.2.3　温度：进样口 230℃;检测器230℃;柱温170℃。
8.3　测定
　　进样2μL标准系列中各浓度标准使用液于气相色谱仪中,可测得不同浓度山梨酸,苯
甲酸的峰高,以浓度为横坐标,相应的峰高值为纵坐标,绘制标准曲线。同时进样2μL样
品溶液,测得峰高与标准曲线比较定量。
8.4　计算
A3 × 1000
X2 = ─────────────..................(2)
m2×5/25×V4/V3×1000
式中：X2──样品中山梨酸或苯甲酸的含量,g/kg;
　　　A3――测定用样品液中山梨酸或苯甲酸的含量,μg;
　　　V3――加入石油醚―乙醚(3：1)混合溶剂的体积,mL；
　　　V4─―测定时进样的体积,μL；
　　　m2──样品的质量,g;
　　　 5─―测定时吸取乙醚提取液的体积,mL;
　　　25──样品乙醚提取液的总体积,mL。
　　由测得苯甲酸的量乘以1.18,即为样品中苯甲酸钠的含量。

　　　　　　　　　　　　　　　禁用防腐剂定性试验

9　硼酸、硼砂
9.1　试剂
9.1.1　6N盐酸：量取盐酸100mL,加水稀释至200mL。
9.1.2 4％碳酸钠溶液。
9.1.3 0.1N氢氧化钠溶液：称取2g氢氧化钠,溶于水并稀释至500mL。
9.1.4 姜黄试纸:称取20g姜黄粉末,用冷水浸渍4次,每次各100mL,除去水溶性物质后,残
渣在100℃干燥。加100mL乙醇,浸渍数日,过滤。取1×8cm滤纸条,浸入溶液中,取出,于空
气中干燥,贮于玻璃瓶中。
9.2 操作方法
9.2.1　样品处理
　　称取3～5g固体样品,加4％碳酸钠溶液充分湿润后,于小火上烘干、炭化后再置高温
炉中灰化。量取10-20mL液体样品,加4％碳酸钠溶液至呈碱性后,置水浴上蒸干、炭化后
再高温炉中灰化。
9.2.2　定性试验
9.2.2.1　姜黄试纸法：取一部分灰分,滴加少量水与6N盐酸至微酸性,边滴边搅拌,使
残渣溶解,微温后过滤。将姜黄试纸浸入滤液中,取出试纸置表面皿上,于60～70℃干燥,
如有硼酸、硼砂存在时,试纸显红色或橙红色,在其变色部分熏以氨即转为绿黑色。
9.2.2.2　焰色反应
　　取灰分置于坩埚中,加硫酸数滴及乙醇数滴,直接点火,硼酸或硼砂存在时,火焰呈
绿色。
10 水杨酸
10.1 试剂
10.1.1　1％三氯化铁溶液。
10.1.2 10％亚硝酸钾溶液。
10.1.3　50％乙酸。
10.1.4　10％硫酸铜。
10.2 操作方法
10.2.1　样品提取
　　按GB 5009.28―85《食品中糖精钠的测定方法》4.1操作,将乙醚提取液蒸干后,残
渣备用。
10.2.2　定性试验
10.2.2.1　三氯化铁法：残渣加1-2滴1％三氯化铁溶液,水杨酸存在时显紫堇色。
10.2.2.2 确证试验,溶解残渣于少量热水中,冷后加4-5滴10％亚硝酸钾溶液,4-5滴
50％乙酸及1滴10％硫酸铜溶液,混匀,煮沸0.5h,放置片刻,水杨酸存在时呈血红色(
苯甲酸不显色)。

━━━━━━━━━━━━━━

附加说明：
　本标准由全国卫生标准技术委员会食品卫生标准分委员会提出,由卫生部食品卫生监
督检验所归口。
　　本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
中华人民共和国卫生部1985-05-16发布 1985-12-01实施